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Ask TaqMan ®: Ep. 1 Real-Time PCR 소프트웨어의 라벨링 시Technical Replicate 지정방법

1,564 views · Published 26 October 2012 · 2:43 · Indexed 22 October 2026

Channel: Thermo Fisher Scientific · 2012 · Education

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Real-Time PCR에 대한 사용자 여러분의 질문을 등록하시면 라이프 테크놀로지스의Sr. Field Application Specialist인 Doug Rains이 도와드립니다. 

[Script]
안녕하세요. 실시간 PCR에 대한 질문에 답하는 'TaqMan®에게 물어봐'입니다. 저는 라이프테크놀로지스의 더그입니다. 오늘은 실시간 소프트웨어 템플릿 라벨링에서 특히 technical replicate을 지정할 때 흔히 경험하는 문제를 해결해 드리겠습니다.
일반인들에게 "technical replicate"를 말할 때는 동일 분석에서 증폭된 동일 샘플을 정확히 같은 양 담고 있는 웰이라고 설명합니다. 실험자들은 대개 동일한 샘플을 3개 만들어 실험합니다. 굳이 3개가 아니어도 되지만, 실행을 마쳤을 때 분석의 정밀도를 측정하고 주입 재현성을 확인하기 위해 여러 개를 만듭니다. Replicate도 범위를 벗어난 웰을 확인해 제외시켜 최종 데이터의 정확성을 높이는데 도움을 줍니다. 
실시간 분석 소프트웨어는 작업 완료 후 technical replicate로 라벨링된 모든 웰에서 표적에 대한 Ct 평균을 구합니다. 그런데 어느 웰이 technical replicate인지 모르면 그렇게 할 수 없습니다. 흔하게 나타나는 라벨링 문제를 보여드리겠습니다. Replicate가 모두 올바른 조직 유형으로 명명되어 있지요. 하지만 끝에 1, 2, 3이라고 숫자가 붙어있습니다. 논리적으로 보일 수는 있지만 소프트웨어는 이를 완전히 별개의 샘플 3개로 인식합니다.
그래서 평균Ct 평균을 구하지 않고 별개로 취급하지요. 하지만 간단한 방법이 있습니다. '설정'으로 돌아가 숫자 없이 새 샘플 이름 두 개를 추가합니다. 그리고 올바른 웰에 이 샘플을 배정합니다. 이제 '분석'으로 돌아가 플레이트를 다시 분석하면 평균 Cts 가 계산됩니다. 
기억하세요, Applied Biosystems® 기기의 실시간 소프트웨어는 매우 너그러워 언제든지 웰 특정 설정 정보를 바꾸고 데이터를 재분석할 수 있습니다. 그러니  라벨링을 잘못했다고 해서 실행 파일을 삭제하진 마십시오. 실시간 PCR에 대해 질문이 있으시면 TaqMan®에게 물어보세요. 트위터나 페이스북, 홈페이지 LifeTechnologies.com/askTaqMan로 질문을 보내실 수 있습니다

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